Metodología para la evaluación automatizada de la expresión del receptor de vitamina D mediante técnica inmunocitoquímica / Methodology of automated Vitamin D receptor immunocytochemical expression análisis

Introducción: la citología permite examinar células de un tejido de manera mínimamente invasiva, sin embargo, la capacidad de realizar técnicas complementarias como la inmunocitoquímica (ICQ) no está exenta de dificultades. Es el objetivo de nuestro trabajo presentar una metodología que permita la utilización de ICQ automatizada asociada a un análisis automatizado mediante técnica de patología digital. Métodos: se incluyeron 5 sujetos sanos y se obtuvieron muestras de superficie ocular utilizando un citocepillo. La muestra fue procesada de manera automatizada mediante citología en fase líquida. Posteriormente se realizó ICQ automatizada para detectar la positividad nuclear del receptor de vitamina D. Para la evaluación, se utilizaron dos métodos: cuantificación directa bajo microscopio de luz y análisis automatizado usando analizador de imágenes en las diapositivas digitales obtenidas con un Scanner. El porcentaje de positividad encontrado con ambos métodos fueron comparados utilizando la prueba de Kappa. Resultados: todas las muestras presentaron una celularidad adecuada. En todos los casos fue posible realizar ICQ automatizada, más aún, todas las muestras presentaron una calidad óptima. Al comparar ambos métodos (manual versus automatizado) se observó un nivel de acuerdo sustancial (Kappa=0,69). Conclusiones: la metodología presentada en este manuscrito permite la evaluación automatizada de marcadores inmunohistoquímicos de la superficie ocular de manera mínimamente invasiva, siendo similar al conteo manual, pero más objetivo y reproducible. Esta técnica podría ser útil para el estudio proteómico en patologías como la enfermedad por ojo seco.

Introduction: Cytology tests use small amounts of tissue samples for diagnosis as a minimally invasive technique; however, the ability to perform complementary methods such as immunocytochemistry (ICC) is not without difficulties. The aim of our work is to present a method that allows the use of automated ICC associated with an automated image analysis using digital pathology. Methods: Five healthy subjects were included, and ocular surface samples were obtained using a cytobrush. The sample was processed as liquid-based cytology. Automated ICC was subsequently performed to detect vitamin D receptor nuclear positivity. Two methods were used for evaluation: manual counting under a light microscope and automated analysis using an image analyzer on digitized slides. The percentage of positivity found in both methods was compared using the Kappa test. Results: All samples presented adequate cellularity. In all cases, it was possible to perform automated ICC; moreover, all samples presented optimal quality. When comparing both methods (manual versus automated), a substantial level of agreement was seen (Kappa=0.69). Conclusions. The method presented in this manuscript allows the minimally invasive automated evaluation of ocular surface ICC markers, being like manual counting but more objective and reproducible. This technique could be useful for proteomic study in pathologies such as dry eye disease.

Evidence of autophagic vesicles in a patient with Lisch corneal dystrophy / Evidência de vesículas autofágicas em paciente com distrofia corneana de Lisch

ABSTRACT Lisch corneal dystrophy is a rare corneal disease characterized by the distinctive feature of highly vacuolated cells. Although this feature is important, the nature of these vacuoles within corneal cells remains unknown. Here, we sought to analyze corneal cells from a patient diagnosed with Lisch dystrophy to characterize the vacuoles within these cells. Analyses using histopathology examination, confocal microscopy, and transmission electron microscopy were all consistent with previous descriptions of Lisch cells. Importantly, the vacuoles within these cells appeared to be autophagosomes and autolysosomes, and could be stained with an anti-microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3 (LC3) antibody. Taken together, these findings indicate that the vacuoles we observed within superficial corneal cells of a patient with Lisch corneal dystrophy constituted autophagosomes and autolysosomes; this finding has not been previously reported and suggests a need for further analyses to define the role of autophagy in this ocular disease.

RESUMO A distrofia corneana de Lisch é uma doença rara, caracterizada principalmente pela presença de células altamente vacuoladas. Embora esta característica seja importante, a natureza desses vacúolos dentro das células da córnea permanece des conhecida. Aqui, procuramos analisar as células da córnea de um paciente diagnosticado com distrofia de Lisch para caracte rizar os vacúolos dentro dessas células. Análises utilizando exame histopatológico, microscopia confocal e microscopia eletrônica de transmissão foram todas consistentes com descrições previas de células de Lisch. Importante, os vacúolos dentro dessas células pareciam ser autofagossomos e autolisossomos, e po deriam ser corados com um anticorpo proteico 1A/1B-cadeia leve 3 (LC3) da proteína anti-microtúbulo associado a microtúbulos. Em conjunto, esses achados indicam que os vacúolos observados nas células superficiais da córnea de um paciente com distrofia corneana de Lisch constituíram autofagossomos e autolisossomos. Esse achado não foi relatado anteriormente e sugere a necessidade de mais análises para definir o papel da autofagia nessa doença ocular.

Evaluación histopatológica en las muestras de cirugía de pterigión ¿Es necesario? / Histopathological evaluation of pterygium surgical samples: is this important?

Introducción: la neoplasia escamosa de superficie ocular (NESO) puede llevar a problemas estéticos y funcionales oculares. El pterigión en cambio es una patología benigna que cuando tiene un manejo quirúrgico las muestras son desechadas sin análisis histopatológico. El objetivo es hacer una revisión acerca de la fisiopatología, factores de riesgo e incidencia de NESO en lesiones clínicamente diagnosticadas como pterigión. Métodos: artículo de revisión. Se revisó la base de datos electrónica pubmed utilizando palabras claves como pterygium AND OSSN. Se revisaron los artículos en inglés y español que tuvieran información pertinente para dar respuesta a nuestro objetivo. Resultados: ambas patologías comparten características clínicas que hacen difícil diferenciarlas sólo en base al examen físico, y eventualmente pueden coexistir. No existen en Chile estudios relacionados a la prevalencia ni menos a la coexistencia de ambas patologías. Se encontraron frecuencias de NESO en pterigión entre 0,65 y 9,8 por ciento dependiendo de la región geográfica. Conclusiones: es importante mantener un alto nivel de sospecha para diagnosticar una NESO en pterigión y es importante crear conciencia en los oftalmólogos que estas lesiones pueden coexistir. Se requieren estudios prospectivos para analizar la incidencia de las NESO en pterigión en las distintas latitudes de nuestro país.(AU)

Introduction: ocular surface squamous neoplasia (OSSN) can lead to aesthetic and functional ocular problems. Pterygium, on the other hand, is a benign pathology that, when it has a surgical management, the samples are discarded without histopathological analysis. The objective is to review the pathophysiology, risk factors and incidence of OSSN in clinically diagnosed lesions such as pterygium. Methods: review article. The pubmed electronic database was reviewed using keywords such as pterygium AND OSSN. We reviewed articles in English and Spanish that had relevant information to respond to our objective. Results: both pathologies share clinical characteristics that make it difficult to differentiate them only based on the physical examination, and eventually they can coexist. There are no studies in Chile related to prevalence or less to the coexistence of both pathologies. Frequencies of OSSN in pterygium were found between 0.65 and 9.8 percent depending on the geographical region. Conclusions: is important to maintain a high level of suspicion to diagnose OSSN in pterygium and it is important to create awareness in ophthalmologists that these lesions can coexist. Further prospective studies are necessary to analyze the incidence of OSSN in pterygium in the different latitudes of our country .(AU)

Aspirina en retinopatía diabética / Aspirin in diabetic retinopathy

La retinopatía diabética es un causa importante de discapacidad por ceguera en el mundo occidental. Se han explorado múltiples intervenciones farmacológicas destinadas a su tratamiento. En ese sentido destacan dos estudios multicéntricos (ETDRS y DAMAD), en los cuales se comparó el efecto de la aspirina contrastada con placebo, no encontrando diferencias de significado clínico entre ambos grupos, en términos de la progresión de la enfermedad, ni tampoco un aumento en la morbilidad, específicamente de la complicaciones hemorrágicas a nivel ocular. Posteriormente, de observaciones realizadas tanto en seres humanos, pero principalmente en animales, se ha postulado el rol de un fenómeno inflamatorio en la génesis de los cambios fisiopatológicos observados en la retinopatía diabética con un efecto beneficioso de la aspirina cuando ésta es administrada en un rango de dosis en las que este fármaco presenta un efecto antiinflamatorio. Estas observaciones realizadas en modelos experimentales resultan promisorias y han de ser corroboradas idealmente en ensayos clínicos randomizados para su aplicación en clínica. Dado el estado actual del conocimiento, resulta indicado el uso de aspirina en profilaxis de eventos cardiovasculares en pacientes de riesgo con retinopatía diabética, ya que no existe evidencia de un riesgo incrementado de eventos hemorrágicos a nivel ocular en este grupo de pacientes.

Interconsultas de pediatría a psiquiatría infantil / Pediatric referral to child psychiatry

Este trabalho informa sobre la demanda por interconsulta al Servicio de Psiquiatria Infantil del Hospital Luis Calvo Mackenna. Este estudio forma parte de una evaluación más amplia de salud mental infantil en el SSMO, con el objeto de detectar necesidades de capacitación. Se muestra que los problemas psiquiátricos infantiles constituyen una demanda importante y difícil de atender en el nivel secundario. Los diagnósticos principales son los trastornos emocionales, síndrome hiperquinético/déficit atencional y trastornos de la conducta. La demanda satisfecha es cercana e un 40%, y la concordancia diagnóstica entre el médico de atención primaria y el especialista es alta (73,4%). Se efectúan algunas consideraciones acerca de las líneas de trabajo a futuro: perfeccionamiento y ampliación de normas, organización del servicio especializado y programa de capacitación primario